ИНФОРМАЦИЯ ДЛЯ ЛАБОРАТОРИЙ
Что представляет собой тест T-SPOT.TB?
Тест T-SPOT.TB – это анализ крови, также известный как «тест высвобождения гамма-интерферона» (IGRA), иммунологический тест для диагностики инфицирования микобактериями туберкулеза.
Тест T-SPOT.TB представляет собой тест для диагностики in vitro, который позволяет количественно оценить ответ Т-лимфоцитов, которые были сенсибилизированы к микобактериям туберкулеза. T-SPOT.TB является косвенным тестом, позволяющим диагностировать инфицирование M. tuberculosis (включая заболевание туберкулезом), и предназначен для использования в совокупности с оценкой факторов риска, клинических, рентгенологических данных и других диагностических методов обследования.
Какие пробирки используются для забора крови?
Для взятия крови должны использоваться стандартные пробирки (содержащие литий-гепарин или натрий-гепарин) или пробирки для забора крови Vacutainer® СРТ™.
Можно ли использовать пробирки для взятия крови с ЭДТА?
ЭДТА нарушат секрецию гамма-интерферона клетками крови. Поэтому пробирки с этим антикоагулянтом нельзя использовать при взятии крови для теста T-SPOT.TB.
Какой объем крови требуется для проведения теста Т-SPOT.TB?
Требуемый объем крови для проведения теста:
Взрослые и дети от 10 лет и старше: 6 мл
Дети 2-9 лет: 4 мл
Дети до 2 лет: 2 мл.
Примечание: у пациентов с иммуносупрессией требуется взять 2 пробирки крови.
Тест проводится в течение 25-26 часов. Уже на следующий день после забора крови, можно дать заключение о наличии туберкулезной инфекции.
Влияет ли предшествующая вакцинация БЦЖ на результаты теста T-SPOT.TB?
В отличие от кожных туберкулиновых проб, на результаты теста T-SPOT.TB не влияет предшествующая вакцинация БЦЖ. В тесте T-SPOT.TB используются два специфических антигена M. tuberculosis (ESAT-6 и CFP 10). Эти антигены не выявляются во всех штаммах БЦЖ и у большинства представителей семейства нетуберкулезных микобактерий.
Оборудование, которое должно быть в лаборатории для проведения теста:
Центрифуга для выделения PBMC (минимум 1800 RCF, способная поддерживать температуру образцов (18-25 °С) при использовании центрифугирования с градиентом плотности для выделения клеток)
Инкубатор с увлажнителем, способным поддерживать температуру 37±1 °С и поддержание 5% уровня СО2
Регулируемые автоматические пипетки
Устройство для визуализации и документирования, напр., стереомикроскопом, увеличительное стекло, либо цифровой визуализатор для подсчета лунок
Из чего состоит набор T-SPOT.TB:
1 микротитровальный планшет: 96 лунок, поставляемая в виде 12 х 8-лунок стрипов; лунки покрыты мышиными моноклональными антителами к интерферону-гамма
2 флакона (0,8мл) Панель А: содержит антиген ESAT-6, бычий альбумин и антимикробные агенты
2 флакона (0,8мл) Панель В: содержит антиген CFP10, бычий альбумин и антимикробные агенты
2 флакона (0,8мл) Положительный контроль: содержит фитогемагглютинин для оценки функциональной способности клеток, бычий альбумин и антимикробные агенты
1 флакон (50мкл) 200х концентрированный Конъюгирующий реагент: мышиные моноклональные антитела к интерферону-гамма, конъюгированные с щелочной фосфатазой
1 флакон (25мл) Растворимого субстрата: готовый к использованию раствор BCIP/NBT+
Если Ваша лаборатория не может проводить тест T-SPOT.TB ежедневно или ВЫ должны транспортировать кровь для исследования в другую лабораторию, Вы можете использовать реагент T-Cell Xtend.
T-Cell Xtend® - реагент, продлевающий время до начала проведения исследования максимум на 32 часа.
Механизм действия реагента T-Cell Xtend:
При заборе крови происходит ряд изменений, в том числе активация гранулоцитов, приводящих к выработке пероксида, который ингибирует высвобождение интерферона γ Т-клетками. Использование реагента T-Cell Xtend блокирует гранулоциты и позволяет образцам храниться до 32 часов.
Реагент T-Сell Xtend производится также компанией Oxford Immunotec.
Реагент T-Cell Xtend прошел клинические испытания только при проведении теста T-SPOT.TB. На других тестах реагент не исследовался.
Результаты теста T-SPOT.TB могут быть положительными, отрицательными, сомнительными или неопределёнными. Результат определяется путем подсчета и регистрация количества «пятен» в лунках.
Какова тактика при получении сомнительных или неопределенных результатов теста?
В случае получения сомнительных и неопределенных результатов рекомендуется проведение повторного анализа с использованием новой пробы крови, взятой во время следующего визита пациента к врачу.
ПРЕИМУЩЕСТВА ТЕСТА T-SPOT.TB:
Точность:
T-SPOT.TB - единственный тест для диагностики туберкулеза, чувствительность и специфичность которого по данным основных клинических исследований превышают 95% .
Достоверность:
T-SPOT.TB позволяет выявить инфицированных микобактериями туберкулеза даже среди «проблемных» популяций пациентов, включая иммигрантов и иммунокомпрометированных больных, не имеет перекрестных реакций с вакциной БЦЖ.
Простота:
Тестирование методом T-SPOT.TB требует всего одного визита к врачу и одной пробирки крови. Все этапы теста контролирует лаборатория.
Тест T-SPOT.TB может использоваться у всех категорий пациентов, в том числе для скрининга туберкулезной инфекции в группах риска.
